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    ELISA檢測結果解讀
    點擊次數:702 更新時間:2023-04-23

       ELISA檢測結果可以定量、定性或半定量地解釋。在定量檢測中,使用已知標準的連續稀釋液來生成標準曲線,通常是光密度(OD)與濃度的關系。由此,可以計算出未知樣品中目標物的精確數量。

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                           標準曲線計算和ELISA實驗中未知物目標濃度測定示例

      在定性檢測中,通常仍會通過使用酶標儀來收集數據,但結果將通過與沒有標準曲線的空白和/或陰性孔的比較來解釋為陽性或陰性。

      半定量檢測也是在不使用連續稀釋或標準曲線的情況下收集數據。然而,包含陰性和陽性標準,通常是高陽性和低陽性,有利于相對比較未知樣本井和已知狀態的樣本孔之間的水平。

    通過使用這些標準來監測檢測的可重復性,可以設定一個臨界值,超過臨界值的結果確定為陽性,低于臨界值的為陰性。一些檢測方法可能還包括一個“灰區"。對于數值落在這個區域的樣品,建議重新測試或進一步調查。

      雖然定量檢測在某些情況下可能是可取的,但在每塊板上包含一條完整的標準曲線會占用寶貴的孔位。因此,根據用戶希望從檢測結果中獲得的信息,存在一種權衡。

      像許多檢測方法一樣,從ELISA獲得的結果很少可能是100%準確的,假陽性和假陰性結果都有可能。因此,大多數測試將與靈敏度和特異性相關;它們越接近100%,測試就越好。

    有許多因素會影響這些值,例如:

    1、非特異性結合或交叉反應的高背景;

    2、抗體對其目標親和力差;

    3、非最佳檢測條件;

    4、樣本條件和復雜性。

    因此,計算靈敏度和特異性的數值是許多ELISA檢測方法發展的一個重要步驟,特別是在診斷環境中,以確定獲得的任何結果的信息量和可靠性。


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