這些會導致轉基因探針法PCR試劑盒變質的因素您知道嗎?
點擊次數:531 更新時間:2023-01-16
轉基因探針法PCR試劑盒具有敏感性高、特異性強、快速等特點,目前廣泛應用于農獸藥、真菌殘留檢測,該方法從加樣、洗板、顯色到讀數步驟繁多,其中任何一步控制不好都可能影響檢測結果的準確性。
今天咱們來了解下會導致轉基因探針法PCR試劑盒變質的因素,希望大家多多注意:
1、方法學的影響:測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。
2、樣本因素:標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素,者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
3、試劑因素:不同批次的試劑在制作過程中很難保證質量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執行這標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。
4、操作因素:操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
5、灰區的設置:通常情況下,定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-offvalue,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據。